█ 产品说明:
本试剂盒用于EGY48-pLacZi酵母杂交系统中的LacZ报告基因的检测。当有互作发生，LacZ报告基因表达，生成β-半乳糖苷酶，将X-Gal切割成半乳糖和深蓝色的底物5-溴-4氯靛蓝。
█ 系统工作原理
在 EGY48-pLacZi 酵母菌株中，报告基因 LacZ 的启动子下游含有 LexA 操纵子序列。当待测的“诱饵”与“猎物”发生特异性相互作用时，会重建一个有功能的转录激活复合物，从而启动下游 LacZ 报告基因的转录与表达。
█ 检测化学反应
LacZ 基因编码 β-半乳糖苷酶。该酶在检测中起到关键的催化作用：
1.试剂盒提供的显色底物 X-Gal 是一种无色或浅色的半乳糖苷衍生物。
2.β-半乳糖苷酶能够特异性水解 X-Gal 中的 β-半乳糖苷键。
3.水解反应释放出的产物经氧化后，会生成一种 深蓝色、不溶于水的化合物——5-溴-4-氯靛蓝。
█ 结果判定
阳性互作：酵母菌落或菌斑呈现鲜明的蓝色。
阴性对照：无相互作用的菌落保持原始颜色（通常为白色或浅黄色）。
试剂盒特点
1.可视化结果：颜色反应直观，易于观察和记录。
2.半定量分析：蓝色的深浅与互作强度及报告基因表达水平在一定范围内相关，可用于初步比较互作强弱。
3.广泛用途：是验证酵母杂交初筛结果、优化实验条件或进行突变体互作分析的经典方法。
█ 注意事项
1.需设置严格的对照组以确保结果可靠性。
2.显色反应时间需优化，避免培养时间过长导致背景着色。
3.该检测通常在固体培养基平板上进行，便于菌落观察。
