产品简介:
本产品是专用于染料法(SYBR GreenⅠ)实时荧光定量PCR 的预混体系。试剂含有加样示踪作用的蓝色染料,不影响SYBR Green I荧光的信号采集。2×浓度,操作简单方便;新一代的高效热启动酶,针对qPCR优化的PCR buffer与增强剂,使本产品特异性强,灵敏度高,在宽广的模板浓度范围可以得到良好的标准曲线,定量准确,重复性好,可信度高。本产品中含有特殊的ROX Passive Reference Dye,适应于所有qPCR仪器,无需在不同的仪器上调整ROX的浓度,只需在配制反应体系时加入引物和模板即可进行扩增。
产品特点:
1.扩增效率高、特异性强、灵敏度高、低拷贝扩增依然完美。
2.重复性好,数据更准确,实验更具有说服力。
3.速度快、预变性时间短。
4.稳定性好、室温一个月性能无下降。
5.特殊的ROX参比染料,适用于所有qPCR仪,无需在不同的仪器上调整ROX浓度。
6.试剂含有加样示踪作用的蓝色染料,不影响SYBR Green I荧光的信号采集;方便客户确认是否加入该试剂。
实验数据图:




三步法荧光定量PCR
步骤 | 温度 | 时间 |
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预变性 | 95℃ | 30 s |
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变性 | 95℃ | 10 s | 35-40 个循环 |
退火 | 56-64℃ 1) | 10 s |
延伸 | 72℃ | 30 s 2) |
融解曲线分析 3) | | | |
| 95℃ | 15 s |
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| 60℃ | 1 min |
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| 95℃ | 15 s |
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| 60℃ | 15 s |
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注意:
1)无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度。
2)对于300bp以内的片段,延伸时间30s即可,200bp以内的片段,延伸时间20s即可。
3)本说明是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定,融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定。